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Con el objetivo de contribuir a la caracterización y selección de levaduras con
capacidad de degradar sustratos lignocelulósicos, como el orujo de uva, se evaluó el perfil
de producción de enzimas de dichos microorganismos. Se emplearon 16 levaduras aisladas
de etapas tempranas de la fermentación de orujos de uva y 14 pertenecientes a la Colección
de Microorganismos de INTA Mendoza (CoMIM). La determinación cualitativa se realizó
mediante replica plate en medios inductores específicos para cada actividad enzimática
(celulasa, β-glucosidasa, celobiasa, pectinasa y xilanasa). Los resultados del ensayo,
mostraron que las cepas identificadas como Saccharomyces cerevisiae sólo expresaron
actividad celobiasa (16,7%) en las condiciones del ensayo. En tanto que las cepas no
identificadas, que de acuerdo a su morfología macro y microscópica se presuponen dentro
del grupo no Saccharomyces, presentaron diversas actividades enzimáticas y en algunos
casos más de una actividad enzimática para cada aislado. El mayor porcentaje de levaduras
presentó actividad celobiasa (76,7 %), el 40 % de las levaduras presentaron actividad β-
glucosidasa, el 6,7 % mostraron actividad celulasa, y sólo el 3,3 % expresó la actividad de la
enzima pectinasa. Para ninguno de los dos grupos, la actividad de la enzima xilanasa fue
positiva (0 %). El 53% de los aislados (16 cepas) presentaron solo una actividad enzimática,
correspondiente a la secreción de enzima celobiasa en todos los casos. El 30% conformado
por 9 cepas, fueron capaces de expresar dos actividades enzimáticas: β-glucosidasa y
celobiasa. El 10%, correspondiente a 3 cepas presentaron tres actividades enzimáticas, dos
de ellas secretaron celulasa, β-glucosidasa y celobiasa, y una de ellas pectinasa en lugar de
celulasa. Por último, el 7% restante, no evidenció la expresión de ninguna actividad
enzimática. En conclusión, el espectro enzimático más amplio fue detectado en los
aislamientos no-Saccharomyces. Es por ello, que se seleccionaron tres cepas de levaduras
no-Saccharomyces, aún no identificadas, para seguir siendo evaluadas ya que expresaron
la actividad de tres enzimas, y son potenciales a ser utilizadas en degradación de biomasa
lignocelulósica.
In order to contribute to the characterization and selection of yeasts capable of
degrading lignocellulosic substrates, the enzyme production profile of these microorganisms
was evaluated. 16 yeasts isolated from early stages of grape pomace fermentation and 14
belonging to the Collection of Microorganisms of INTA Mendoza (CoMIM) were used. The
qualitative determination was made by replica plate in specific inducing media for each
enzymatic activity (cellulase, β-glucosidase, cellobiase, pectinase and xylanase). The test
results showed that the strains identified as Saccharomyces cerevisiae only expressed
cellobiase activity (16.7%) under the test conditions. While the unidentified strains, which
according to their macro and microscopic morphology are presumed within the non-
Saccharomyces group, presented various enzymatic activities and in some cases more than
one enzymatic activity for each isolate. The highest percentage of yeasts presented cellulase
activity (76.7%), 40% of yeasts presented β-glucosidase activity, 6.7% showed cellulase
activity, and only 3.3% expressed cellulase activity. pectinase enzyme. For neither of the two
groups, the xylanase enzyme activity was positive (0%). 53% of the isolates (16 strains)
presented only one enzymatic activity, corresponding to the secretion of cellobiase enzyme
in all cases. 30%, made up of 9 strains, were capable of expressing two enzymatic activities:
β-glucosidase and cellobiase. 10%, corresponding to 3 strains, presented three enzymatic
activities, two of them secreted cellulase, β-glucosidase and cellobiase, and one of them
pectinase instead of cellulase. Finally, the remaining 7% did not show the expression of any
enzymatic activity. In conclusion, the broadest enzymatic spectrum was detected in the non-
Saccharomyces isolates. For this reason, three non-Saccharomyces yeast strains, not yet
identified, were selected for further evaluation, since they expressed the activity of three
enzymes, and are potential to be used in degradation of lignocellulosic biomass.
Disciplinas:
Ciencia y tecnología de los Alimentos
Descriptores:
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA - LEVADURA - ORUJO DE UVA - BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA - SACCHAROMYCES CEREVISIAE - BIOMASA
Palabras clave:
Sustratos lignocelulósico - Producción de enzimas - Actividad celobias - Espectro enzimático - Biomasa lignocelulósica
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